Реакции замедленного типа характеризуются, как правило, отсутствием каких-либо гуморальных или клеточных антител. Для диагностики этого вида гиперчувствительности в настоящее время широко применяют кожно-аллергические пробы, реакцию лейкоцитолиза, тест бласт-трансформации малых лимфоцитов и др.
Кожно-аллергические пробы. При исследовании ребенка у педиатра или аллерголога могут проводиться кожно-аллергические пробы. В качестве аллергенов используют гемолитический стрептококк, стафилококк, кишечную палочку и протей.
Аллергены вводят внутрикожно на внутренней поверхности предплечья в количестве 0,1 мл на расстоянии 5 см друг от друга. Реакция учитывается через 24 ч. Диагностическое значение имеют положительные и резкоположительные реакции.
Для установления показаний к специфической гипосенсибилизации используют также лабораторные методы: реакцию лейкоцитолиза, тест бласттрансформа-ции малых лимфоцитов, реакцию пассивной гемагглютинации и др.
Методика проведения кожно-аллергической реакции с актинолизатом. На внутренней поверхности предплечья, ближе к локтевому суставу, справа и слева внутрикожно вводят диагностический актинолизат в объеме 0,3 мл. Для контроля, отступя на 8-10 см от места первых инъекций, вводят ту же дозу стерильного мясо-пептонного бульона (рН 7,0). Результат реакции оценивают через 24 ч.
Реакция лейкоцитолиза. Кровь у больных берут из пальца в объеме 1 мл в стерильную пробирку, содержащую 0,3 мл 5% расвора цитрата натрия.
Цитратную кровь по 0,15 мл разливают в 5 пробирок (по числу испытуемых аллергенов, 1 пробирка — контроль). В 4 пробирки добавляют аллергены по 1 капле (или 0,05 мл), дозированные по 10 кожных доз: гемолитический стрептококк, гемолитический стафилококк, кишечная палочка, протей, в контрольную пробирку - 0,05 мл буферного раствора (рН 8,0). Содержимое пробирок тщательно, но осторожно перемешивают и ставят в термостат на 1 ч. (при температуре 37°С).
Затем из каждой пробирки готовят по 3 мазка, которые красят по методу Крюкова или Романовского-Гимзы и просматривают под имерсионной системой с увеличением 10x90. Подсчет лейкоцитов (100 клеток) проводят в участках, где лейкоциты лежали изолированно от эритроцитов.
Аллерген, обладающий специфическим действием, разрушает минимум 14% лейкоцитов. В контроле разрушенных лейкоцитов должно быть не более 10.
Тест бласттрансформации малых лимфоцитов. Проводится для определения количества трансформировавшихся клеток в бласты под влиянием антигенов. Подсчет проводится на 1000 клеток лимфоцитов, и результат выражается в процентах. Для этого теста кровь берут из вены в количестве 5 мл.
Клинический опыт показывает, что в развитии рецидивирующих стоматологических заболеваний у детей могут играть роль пищевые аллергены, которые проявляются самостоятельно или сочетаются с бактериально-токсической аллергией.
Наиболее доступным методом выявления этого этиологического фактора является заполнение специальной истории болезни, что позволяет определить аллергическую настроенность организма ребенка, и ведение пищевого дневника.
В качестве дополнительных методов диагностики пищевой аллергии на основе пищевого дневника можно рекомендовать лейкопенический индекс Видаля-Вогана и тромбоцитопенический тест. Кожные пробы при этом имеют меньшее диагностическое значение.
Лейкопенический индекс Видаля-Вогана проводится с провокационным завтраком. Натощак определяют число лейкоцитов в 1 мкл крови, через час повторно подсчитывают число лейкоцитов, при этом разница не должна превышать 300 клеток в 1 мкл. Затем больной съедает 50-100 г аллергенного пищевого продукта. Через 30-40 мин. снова подсчитывают содержание лейкоцитов в периферической крови. Проба считается положительной, если количество лейкоцитов после приема аллергенной пищи снизится на 1000 клеток и более. У здоровых людей, наоборот, после приема пищи обычно количество лейкоцитов увеличивается (так называемый пищеварительный лейкоцитоз).
Тромбоцитопенический тест. Сначала подсчитывают число тромбоцитов в периферической крови натощак, а затем повторно через 50, 60 и 90 мин. после провокационного завтрака. Тест считается положительным, если количество тромбоцитов снижается на 15-25% после приема аллергенного завтрака.
|